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Usage recherche Le GHK-Cu en flacon est un réactif de laboratoire réservé à la recherche in vitro, ni médicament ni produit de soin.

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Fiche 07 · Préparation au laboratoire

Reconstituer un flacon de GHK-Cu, étape par étape

Un flacon de 50 mg et 5 mL de diluant donnent 10 mg/mL. Le calcul est simple ; ce sont les détails (diluant, pH, teinte, étiquetage) qui font la qualité d'une solution mère.

Mis à jour le · 4 min de lecture

Avant d'ouvrir le flacon

Le GHK-Cu se présente sous forme de poudre lyophilisée bleue, généralement en flacons de 50 mg ou de 100 mg, contenances nettement plus élevées que celles de la plupart des peptides de recherche (souvent 5 ou 10 mg). Cette particularité change les volumes : il faut davantage de diluant pour obtenir une solution facile à pipeter.

Matériel

  • Flacon de GHK-Cu à température ambiante (sorti du froid 15 à 20 minutes avant, sans l'ouvrir pour éviter la condensation)
  • Eau bactériostatique (eau stérile avec 0,9 % d'alcool benzylique) ou eau stérile pour préparations
  • Seringue ou pipette graduée stérile, aiguille ou embout propre
  • Alcool à 70 % pour le bouchon, gants, surface de travail propre
  • Étiquettes et cahier de laboratoire

Choisir le diluant

L'eau bactériostatique est le choix courant quand le flacon sera ponctionné plusieurs fois : l'alcool benzylique limite la prolifération bactérienne. L'eau stérile convient si la totalité est aliquotée et congelée le jour même. Certaines méthodes utilisent un tampon (phosphate ou HEPES) proche de la neutralité.

Évitez tout tampon contenant de l'EDTA ou du citrate : ces chélatants peuvent retirer le cuivre du peptide.

Deux erreurs propres au peptide de cuivre sont à éviter : un diluant acide (l'acide acétique à 0,6 % utilisé pour certains peptides n'est pas nécessaire ici et peut déplacer le cuivre) et la présence d'un chélatant. Le GHK-Cu est très soluble dans l'eau ; il n'a pas besoin d'aide pour se dissoudre.

Méthode

  1. Planifier la concentration

    Décidez de la concentration de la solution mère avant d'ouvrir le flacon. Pour un flacon de 50 mg : 5 mL donnent 10 mg/mL, 2,5 mL donnent 20 mg/mL. Pour 100 mg : 5 mL donnent 20 mg/mL, 10 mL donnent 10 mg/mL.

  2. Désinfecter

    Retirez la capsule, essuyez le bouchon en caoutchouc à l'alcool à 70 % et laissez sécher.

  3. Ajouter le diluant lentement

    Faites couler le liquide le long de la paroi intérieure du flacon, pas directement sur la poudre, pour limiter la mousse.

  4. Dissoudre sans secouer

    Faites rouler doucement le flacon entre les doigts ou décrivez de petits cercles. La dissolution est rapide ; une teinte bleue homogène apparaît.

  5. Contrôler l'aspect

    La solution doit être limpide, bleue (parfois bleu-vert à forte concentration), sans particules. Un trouble persistant, un dépôt brun ou une couleur inhabituelle doivent faire écarter le flacon.

  6. Étiqueter immédiatement

    Nom du composé, numéro de lot, concentration, diluant, date et initiales.

  7. Ranger ou aliquoter

    Au réfrigérateur pour un usage proche, ou en aliquotes congelées pour une conservation plus longue (voir la fiche conservation).

Calculateur de reconstitution

Indiquez la masse du flacon et le volume de diluant ; le calculateur donne la concentration, le volume à prélever pour une quantité voulue et la concentration molaire approximative.

Calculateur de reconstitution

Concentration10 mg/mL
Volume à prélever10 µL
Molarité de la solution24,9 mmol/L
Prélèvements par flacon500

Outil de calcul pour le laboratoire, exécuté dans votre navigateur. Les résultats ne constituent pas une posologie.

Le calcul molaire suppose une masse molaire de 402 g/mol ; ajustez-la si le certificat d'analyse indique un sel.

Tableau de correspondance rapide

Flacon Diluant Concentration 100 µg correspondent à
50 mg 2,5 mL 20 mg/mL 5 µL
50 mg 5 mL 10 mg/mL 10 µL
50 mg 10 mL 5 mg/mL 20 µL
100 mg 5 mL 20 mg/mL 5 µL
100 mg 10 mL 10 mg/mL 10 µL

Ces volumes concernent des prélèvements de laboratoire ; ils ne constituent en aucun cas une posologie.

Pourquoi la solution est bleue (et quand s'inquiéter)

La teinte bleue provient du cuivre(II) lié au peptide. Elle est attendue et s'intensifie avec la concentration. Une solution incolore suggère l'absence de cuivre (GHK libre) ; une teinte qui vire au vert franc, au jaune ou au brun, ou un précipité, évoquent une dégradation, un pH inadapté ou une contamination. Dans le doute, comparez avec le certificat d'analyse du fournisseur et demandez le rapport correspondant à votre numéro de lot.

Ressources complémentaires

Le guide de reconstitution des peptides lyophilisés de Peptides EU décrit la même méthode générale et les conditions de conservation avant et après reconstitution. Leur note sur le GHK-Cu insiste sur un point utile : le peptide de cuivre peut mettre un peu plus de temps à s'éclaircir qu'un peptide linéaire simple, et une légère teinte bleue persistante est normale.

Sources citées

  1. Pickart L et al. (1980). Growth-modulating plasma tripeptide may function by facilitating copper uptake into cells Nature. PubMed 7453802